Co je to 2D gelová elektroforéza?

Dvourozměrná (2D) gelová elektroforéza je metoda, kterou vědci používají k rozebírání a analýze proteinových směsí prvními separací pásů proteinů podél dvou různých os.Jedná se o techniku, která se nejčastěji používá při řešení komplikovaných nebo silných směsí proteinů, často s překrývajícími se velikostmi proteinů.2D gelová elektroforéza se liší od jednorozměrné gelové elektroforézy, protože bývalá metoda používá separaci proteinů založených na dvou různých proteinových charakteristikách, zatímco jednorozměrná gelová elektroforéza obvykle odděluje proteiny založené na jedné charakteristice, jako je velikost proteinu.

gelová elektroforéza je častoPoužívá se ve výzkumu k oddělení molekul pomocí skutečnosti, že mnoho biologických molekul, jako je DNA, má elektrický náboj.Tuto skutečnost lze použít ve výhodu vědců, protože nabité molekuly mohou být odděleny velikostí pomocí porézního substrátu, jako je agaróza, použitím gradientu napětí přes porézní iontový gel.V průběhu času projdou molekuly tímto gelem směrem k náboji, který je opačný k přirozenému náboji molekuly.Malé molekuly a silně nabité molekuly se pohybují rychleji než velké molekuly nebo proteiny, které jsou slabě nabité.Ve 2D gelové elektroforéze, po oddělení proteinů prostřednictvím jediné charakteristiky, která vytváří gradient, může být gel otočen do strany, aby oddělil ty dříve výsledné pásy založené na druhé charakteristice.Charakteristika, kterou lze proteinové agregáty rozdělit na proteiny jednotlivých složek.Proteinová hmota je další společnou charakteristikou používanou k oddělení proteinů ve 2D gelové elektroforéze.Poté, co proteiny probíhají na gelu přes jediný pruh v jednorozměrné gelové elektroforéze, může být tento gel odstředěn v odstředivce a stahovat těžší proteiny rychleji než menší, méně masivní proteiny.Směr tahu je kolmý ke směru, kterým byly proteiny nakresleny gelem kvůli přitažlivosti k elektrickému náboji přes gradient napětí.Označování.Separace proteinu založená na charakteristické hmotě se také používá, když jsou proteiny označeny jinými molekulami.Tuto techniku lze použít s těmito proteinovými komplexy, protože označené proteiny propadnou snadněji gelem než netagované proteiny.Tyto typy gelů se používají v západních blotech a jiných testech na bázi proteinů.Agaróza se častěji používá pro separaci segmentů DNA